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植物類黃酮檢測試劑盒(微板法)

簡要描述:植物類黃酮檢測試劑盒(微板法),雅吉生物是一家生物企業主營ATCC細胞,細胞系,原代細胞和培養試劑,重組蛋白,ELISA試劑盒、抗體、熒光定量PCR檢測試劑盒

  • 產品型號:TP1111
  • 廠商性質:生產廠家
  • 更新時間:2024-11-01
  • 訪  問  量:1061

詳細介紹

葉綠體是光合作用的細胞器,在光合作用研究中,常需要用提取的葉綠體展開下游研究工作,葉綠體中所含的色素主要有兩大類

,葉綠素(包括葉綠素a和葉綠素b)和類胡蘿卜素(包括胡蘿卜素和葉黃素),它們與類囊體膜上的蛋白質結合,成為色素蛋白復合

體,其中葉綠素又稱葉綠體色素(Chlorophyll);類胡蘿卜素是一種脂溶性且具有營養特性的化合物,給植物和動物提供天然色素

,是重要的抗氧化劑,并有能力轉換為必需維生素,類胡蘿卜素可預防細胞,組織和基因損毀,增強身體免疫系統,抵御感染,

減少癌癥風險,保護心臟。


植物類黃酮檢測試劑盒(微板法)檢測原理是類胡蘿卜素不溶解于水,而溶于有機溶劑,以有機溶劑粗提類

胡蘿卜素,根據朗伯-比爾定律,某有色溶液的吸光度(A)與其中溶質濃度(C)和液層厚度(L)成正比,即A=αCL,其中α為比例常

數,當溶液濃度以百分比濃度為單位,層液厚度為1cm時,α為該物質的吸光系數。在本試劑盒情況下葉綠素a、葉綠素b、

類胡蘿卜素分別在665nm、649nm、470nm處有最大吸收波,根據經驗公式可計算出葉綠素a、葉綠素b、總葉綠素、類胡蘿卜

素含量,主要用于植物組織中葉綠素、類胡蘿卜素的提取以及以酶標儀定量檢測葉綠素a、葉綠素b、總葉綠素、類胡蘿卜素含量

。該試劑盒僅用于科研領域,不適用于臨床診斷或其他用途。


操作步驟(僅供參考)

自備材料:

1、蒸餾水

2、電子天平、研缽或勻漿器、離心管或試管

3、低溫離心機、恒溫箱或水浴鍋、酶標儀、酶標板


操作步驟(僅供參考):

1、準備樣品∶

①植物樣品︰取1g植物組織或水果中層果肉,加入2.5ml PAL Lysis Buffer,冰浴情況下充分搗碎研磨或勻漿,4℃ 10000r/min

離心15~20min,留取上清液,-20℃凍存,用于苯丙氨解氨酶的檢測。

②血漿、血清和尿液樣品︰血漿、血清按照常規方法制備后可以直接用于該試劑盒的測定,-20℃凍存,用于苯丙解氨的檢測。

③細胞或組織樣品∶取恰當細胞或組織裂解液,如果有必要需進行適當勻漿,4℃ 10000r/min離心15~20min,取上清液,

-20℃凍存,用于苯丙酸解氨酶的檢測。④高活性樣品︰如果樣品中含有較高活性的苯丙解氨酶,可以使用蒸餾水或PAL

Lysis Buffer稀釋進行恰當的稀釋。

2、PAL加樣∶

取96孔板,按照下表設置對照孔、測定孔,溶液應按照順序依次加入,并

注意避免產生氣泡。如果樣品中的PAL活性過高,可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定,樣品的檢測最好能設置2平行孔,

求平均值。

加入物(μl)對照孔測定孔

蒸餾水150100

待測樣本5050

PAL Assay Buffer-50

3、PAL檢測︰

以對照孔為對照(調零),酶標儀立即測定290nm處測定孔的吸光度(記為   A測定0);40℃準確孵育1h,立即加入10μl PAL終止

液終止反應(備選方案),以對照孔為對照調零,酶標儀立即測定290nm處測定孔的吸光度(記為A測定1)。

注意︰加入PAL終止液終止反應為非必須步驟,可37℃準確孵育1h后直接以對照孔為對照調零,酶標儀立即測定290nm處測定

孔的吸光度。

注意事項∶

1、待測樣品中不能含有酶抑制劑,同時需避免反復凍融。

2、獲得上清液為PAL酶液,應盡快檢測,亦可-20°℃保存。

3、如果沒有可測定紫外區的酶標儀和酶標板,也可以使用紫外分光光度計和石英比色皿,但應注意比色杯的最小檢測體積。

4、每次檢測指標不宜過多,否則操作時間不一,有可能導致樣本間的差異。5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。




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